青海發(fā)光桿菌制備工藝的特點
青海發(fā)光桿菌細菌、酵母菌的種子制備就是一個細胞數(shù)量增加的過程。細菌的斜面培養(yǎng)基多采用碳源*而氮源豐富的配方,牛肉膏、蛋白胨常用作有機氮源。細菌培養(yǎng)溫度大多數(shù)為37 ℃,少數(shù)為28 ℃,細菌菌體培養(yǎng)時間一般1~2天,產(chǎn)芽孢的細菌則需培養(yǎng)5~10天。
霉菌、放線菌的種子制備一般包括兩個過程,即在固體培養(yǎng)基上大量青海發(fā)光桿菌制備和在液體培養(yǎng)基中大量菌絲的種子制備過程。
青海發(fā)光桿菌制備是種子制備的開始,是發(fā)酵的一個重要環(huán)節(jié)。孢子的質(zhì)量、數(shù)量對以后菌絲的生長、繁殖和發(fā)酵產(chǎn)量都有明顯的影響。不同菌種的孢子制備工藝有其不同的特點。
(1)放線菌孢子的制備 放線菌的孢子培養(yǎng)一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
采用哪一代的斜面孢子接入液體培養(yǎng),視菌種特性而定。采用母斜面孢子接入液體培養(yǎng)基有利于防止菌種變異,采用子斜面孢子接入液體培養(yǎng)基可節(jié)約菌種用量。菌種進入種子罐有兩種方法。一種為孢子進罐法,即將斜面孢子制成孢子懸浮液直接接入種子罐。此方法可減少批與批之間的差異,具有操作方便、工藝過程簡單、便于控制孢子質(zhì)量等優(yōu)點,孢子進罐法已成為發(fā)酵的一個方向。另一種方法為搖瓶菌絲進罐法,青海發(fā)光桿菌適用于某些生長發(fā)育緩慢的放線菌,此方法的優(yōu)點是可以縮短種子在種子罐內(nèi)的培養(yǎng)時間。
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